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給細胞更多的安全保護—支原體清除系列

給細胞更多的安全保護—支原體清除系列

      支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑 0.2μm)并獨立生活的微生物,沒有細胞壁,表面由胞質(zhì)膜構(gòu)成,約有 1%的支原體可通過濾菌器。支原體污染細胞后,培養(yǎng)液可不發(fā)生混濁,多數(shù)情況下細胞病理變化輕微或不顯著。細微變化也可由于傳代、換液而緩解,因此易被忽視。但個別嚴重者,可致細胞增殖緩慢,甚至從培養(yǎng)器皿脫落。支原體污染細胞后會影響下游試驗結(jié)果。德國 Applichem 所提供 Myco 系列支原體清除產(chǎn)品可以直接整合到質(zhì)膜上破壞支原體的完整性,從而有效地清除支原體污染,而且沒有細胞毒性。另有支原體檢測與預(yù)防試劑盒可以給細胞提供更多的安全保護。

支原體清除系列 
Myco-3(A5240)
Myco-3主要成分為氟喹酮類的環(huán)丙沙星,100倍濃縮液直接加入培養(yǎng)基中,每2~3天換液一次,連續(xù)處理14天,可清除大多數(shù)支原體污染。用Myco-3無法清除的頑固支原體或停用后又出現(xiàn)支原體污染的情況建議使用Myco-1和Myco-2來處理。
注:Myco-3停用2周后方可進行支原體檢測。
Myco-1(A5222)與 Myco-2(A5233)
Myco-1 的主要成分為泰妙菌素,Myco-2 的主要成分為二甲胺四環(huán)素(四環(huán)素衍生物)。Myco-1 與 Myco-2 均為 100 倍濃縮液,直接加入培養(yǎng)基中。兩者配合使用:用 Myco-1 處理 4 天后換 Myco-2處理 3 天,如此重復 2~3 次即可。
Myco-1 與 Myco-2 不影響支原體檢測,因此細胞在用這 2 種抗生素處理的過程中可直接進行支原體檢測。
Myco-4(A8366) NEW! 
專利配方,細胞毒性極低,可徹底清除細胞(包括貼壁細胞和懸浮細胞)及病毒培養(yǎng)物中的支原體污染。產(chǎn)品由 1瓶起始處理液和 3 瓶維持液組成。
使用方法
1. 取 4.5ml 細胞培養(yǎng)基(含 5%FCS)加入到無菌培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,再加入 500ul Myco-4 起始處理液混勻。
2. 向培養(yǎng)瓶中加入 5ml 待處理細胞(約 104
~105 單個細胞,含 5% FCS) 注:需確保細胞被完全分散成單個細胞;
而且加入細胞時需將滴頭直接浸入 5ml 混合液中,以避免支原體逸散到空氣中。
3. 正常培養(yǎng)至 80%~90%培養(yǎng)瓶后進行正常傳代,每 9.5ml 傳代細胞中加入 500ul 的 Myco-4 維持液。
4. 2 次重復第三步,即用 Myco-4 維持液連續(xù)處理 3 次可完全清除全部支原體。
注意事項:
1. 一次處理細胞不要超過 105 單個細胞;
2. 高濃度的 FCS 中的蛋白質(zhì)與脂類物質(zhì)會影響 Myco-4 與支原體質(zhì)膜結(jié)合,因此在處理過程中要求使用 5%FCS 濃
度;
3. 病毒中的支原體需要與其宿主細胞一起處理;
4. Myco-4 是與支原體直接接觸后發(fā)揮作用的,而不規(guī)則細胞形態(tài)和細胞團塊都將影響 Myco-4 與支原體的直接接
觸,因此在使用該產(chǎn)品建議用胰酶將細胞處理成表面光滑的單個細胞。

支原體預(yù)防系列 
Incubator-Clean(A5230)——CO2培養(yǎng)箱消毒劑Incubator-Clean 的活性成分為四苯甲基化合物,用于正在進行細胞培養(yǎng)的CO2 培養(yǎng)箱的消毒,可以有效預(yù)防真菌(及芽孢)、細菌、病毒(包括 HIV、HBV)等污染!另外 Incubator-Clean 還可用于無菌工作臺的消毒!每次實驗操作前用本品對臺面進行噴霧處理。
使用方法:噴頭對準 CO2 培養(yǎng)箱的內(nèi)壁進行噴霧使內(nèi)壁完全濕潤即可,使用時無須移出正在培養(yǎng)的細胞。建議培養(yǎng)箱每 2 周用 Incubator-Clean 處理一
次。
Incuwater-Clean(A5219)——CO2培養(yǎng)箱水源消毒劑
Incuwater-Clean 是一種用于 CO2 培養(yǎng)箱內(nèi)保持空氣濕度的水源消毒劑,不會
對金屬水盤造成腐蝕。100 倍濃縮直接加入滅菌水中,使用方便。建議培養(yǎng)箱中每 2~4 周更換一次滅菌水,加入
Incuwater-Clean。
Aquabator-Clean(A9390)——水浴鍋消毒劑
Aquabator-Clean 用于預(yù)防各種水浴鍋中真菌、細菌污染。使用時每升水中加入 10ml Aquabator-Clean,建議每 1~2
周向水浴鍋中加一次該試劑,每 4~6 周給水浴鍋換一次水。


支原體檢測系列
AppliChem 的 3 種支原體檢測試劑盒均根據(jù)支原體 16S rRNA 保守序列設(shè)計引物,經(jīng)由 PCR 反應(yīng)擴增其 16S rRNA 片段,可用于檢測絕大多數(shù)支原體,如 M. arginini, M. arthritidis, M. bovis, M. capricolum,M. fermentans, M. hominis, M. hyorhinis, M. orale, M. pneumonia, M.pulmonis, M,salivarium 等,靈敏度達 100~1000CFU/ml。






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