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BCA法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒（微量法100T/96S）
| 貨號 | SH0626 | 售價（元） | 252 |
| 規(guī)格 | 100T/96S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0626 |
BCA法蛋白質(zhì)含量測定試劑盒（微量法100T/96S） |
100T/96S |
測定意義：
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計算。此外，可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
測定原理：
堿性條件下，蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵，能將Cu2+還原成Cu+；2分子的BCA與Cu+結(jié)合，生成紫色絡(luò)合物，在540-595nm有吸收峰，562nm處吸收峰最強。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0626-100T/96S |
Storage |
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試劑A: 液體 |
25ml |
4℃ |
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試劑B：液體 |
0.5ml |
4℃ |
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標(biāo)準(zhǔn)品：液體 |
2ml |
4℃ |
工作液配制：臨用前請根據(jù)擬用工作液體積（樣本數(shù)×0.2ml），將試劑A和B按照50：1的比例混合，蓋緊后充分混勻。
自備儀器和用品：
臺式離心機、恒溫水浴鍋、可見分光光度計/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/b>
1、液體樣品：澄清液體樣品可以直接測定。
2、組織樣品：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液（自備，根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水）
冰浴勻漿，10000rpm，4℃離心10min，取上清，即待測液。
3 、細菌、細胞：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1ml提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后10000rpm，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
測定操作：
1. 可見分光光度計/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長到562 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液置于60℃水浴預(yù)熱30 min。
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空白管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
測定管 |
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蒸餾水（μl） |
4 |
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標(biāo)準(zhǔn)品（μl） |
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4 |
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待測液（μl） |
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4 |
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工作液（μl） |
200 |
200 |
200 |
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混勻后置于60℃保溫30min，于微量玻璃比色皿/96孔板，于562nm處測定吸光值A，分別記為A空白管、A標(biāo)準(zhǔn)管、A測定管。 |
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注意事項：空白管和標(biāo)準(zhǔn)管只需要做一次。
計算公式：
Cpr (mg/ml)= C標(biāo)準(zhǔn)品×（A測定管－A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管）
=0.5×（A測定管－A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管）
Cpr (mg/g 鮮重)= C標(biāo)準(zhǔn)品×（A測定管－A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管）÷ W
=0.5×（A測定管－A空白管）÷（A標(biāo)準(zhǔn)管－A空白管）÷ W
W: 樣本質(zhì)量，g
注意事項：
BCA法蛋白含量測定試劑盒，適用于測定蛋白濃度在20-5000μg/ml樣品。測定前取1-2個樣做預(yù)實驗，若A測定管－A空白管﹥1.5，需將樣本用提取液稀釋后再測定，以確保測定的準(zhǔn)確性。