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纖維素含量檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S）
| 貨號 | SH0194 | 售價（元） | 624 |
| 規(guī)格 | 50T/48S | CAS號 |
- 產(chǎn)品簡介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號 |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0194 |
纖維素含量檢測試劑盒（分光光度法 50T/48S） |
50管/48樣 |
測定意義：
纖維素是由葡萄糖組成的大分子多糖，通常與半纖維素、果膠和木質(zhì)素結(jié)合在一起，是植物細(xì)胞壁的主要結(jié)構(gòu)成分。纖維素是一種重要的膳食纖維，是自然界中分布最廣、含量最多的一種多糖。
測定原理：
纖維素為β－葡萄糖殘基組成的多糖，在酸性條件下加熱能分解成β－葡萄糖。β－葡萄糖在強酸作用下，可脫水生成β－糠醛類化合物。β－糠醛類化合物與蒽酮脫水縮合，生成糠醛衍生物。顏色的深淺可間接定量測定纖維素含量。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0194-50T/48S |
Storage |
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試劑一：液體 |
50ml |
4℃ |
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試劑二：粉劑 |
1瓶 |
4℃避光 |
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試劑三：液體 |
10ml |
4℃ |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
可見分光光度計、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1ml玻璃比色皿、80％乙醇、丙酮、濃硫酸（不允許快遞）、研缽和蒸餾水。
樣品的前處理：
1、 細(xì)胞壁的提取：取約0.3g樣本，加入1ml 80％乙醇，室溫快速勻漿，90℃水浴20min（加熱過程中EP管可能爆開，建議用膠帶封口或使用防爆EP管），冷卻至室溫，6000g 25℃離心10min，棄上清。沉淀加入1.5ml80％乙醇和丙酮各洗一遍（渦旋振蕩2min左右，6000g 25℃離心10min，棄上清即可），沉淀即為粗細(xì)胞壁，加入1ml試劑一（去除淀粉）浸泡15小時，6000g 25℃離心10min，棄上清，將沉淀干燥，稱重得細(xì)胞壁物質(zhì)（CWM）。
2、 纖維素的提?。?/span>稱取烘干的CWM約 5mg，加入0.5ml蒸餾水充分勻漿(若烘干物質(zhì)質(zhì)地堅硬，可先研碎后再加入0.5ml蒸餾水勻漿，或者用勻漿器勻漿)，勻漿液轉(zhuǎn)移至EP管中，用蒸餾水定容至0.5ml，置于冰水浴中，緩慢加入0.75ml濃硫酸，混勻，冰水浴中靜置30min。8000g 4℃離心10min，取上清液，用蒸餾水稀釋20倍后待測。
測定步驟：
1、分光光度計預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至620nm，蒸餾水調(diào)零。
2、調(diào)節(jié)水浴鍋至95度。
3、工作液的配制：在試劑二中加入4ml試劑三，充分溶解，如較難溶解，可加熱攪拌；用不完的試劑4℃保存一周；
4、加樣表（在EP管中反應(yīng)）：
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試劑（μl） |
空白管 |
測定管 |
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樣本 |
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300 |
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蒸餾水 |
300 |
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工作液 |
70 |
70 |
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濃硫酸 |
630 |
630 |
混勻，置95度水浴中10min（蓋緊，以防止水分散失），冷卻至室溫后，于620nm處，分別讀取空白管和測定管吸光值，ΔA=A測定管-A空白管。
注意：
1、空白管只要做一管。
2、由于濃硫酸具有強腐蝕性，請謹(jǐn)慎操作。
1、標(biāo)準(zhǔn)條件下測定的回歸方程為y = 7.875x - 0.0043；x為標(biāo)準(zhǔn)品濃度（mg/ml），y為吸光值。
2、按樣本質(zhì)量計算：
纖維素（mg /g干重）= [(ΔA＋0.0043) ÷7.875×V1]÷（W×V1÷V2）×20=3.17×(ΔA＋0.0043) ÷W。
V1：加入樣本體積，0.3ml；V2：加入提取液體積，1.25ml；W：樣本干重，約5×10-3g；20：樣本稀釋倍數(shù)。
注意：最低檢測限為1mg/g干重或10ng/ mg prot