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正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定                                             

測(cè)定意義：

皂苷（Saponin）是苷元為三萜或螺旋甾烷類(lèi)化合物的一類(lèi)糖苷，主要分布于陸地高等植物中，也少量存在于海星和海參等海洋生物中。 許多中草藥如人參、遠(yuǎn)志、桔梗、甘草、知母和柴胡等的主要有效成分都含有皂苷。有些皂苷還具有抗菌的活性或解熱、鎮(zhèn)靜、抗癌等有價(jià)值的生物活性。

測(cè)定原理：

使用超聲波提取樣品中的皂苷，利用香草醛-高氯酸顯色體系測(cè)定總皂苷含量。

組成：

自備儀器和用品：

可見(jiàn)分光光度計(jì)、烘箱、水浴鍋、移液器、1ml玻璃比色皿、高氯酸、乙酸、超聲清洗器

總皂苷提?。?/span>

樣本烘干，粉碎過(guò)篩，稱取0.05g，加入1ml提取液，超聲提取1h；8000g，25℃離心10min，取上清待測(cè)。

測(cè)定步驟

1、可見(jiàn)分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至589nm，蒸餾水調(diào)零。

2、測(cè)定管：取0.5ml上清，70℃揮發(fā)至干。加入0.2ml試劑一和0.8ml試劑二，55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中，再加入1000μl試劑三，充分混勻后，589nm下測(cè)定吸光度A1。

3、空白管：取0.5ml提取液，70℃揮發(fā)至干。加入0.2ml試劑一和0.8ml試劑二，55℃水浴20min。吸取200μl加入1ml玻璃比色皿中，再加入1000μl試劑三，充分混勻后，589nm下測(cè)定吸光度A2。計(jì)算△A= A1-A2。

總皂苷含量計(jì)算：

1.以齊墩果酸為對(duì)照品計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 0.0072x - 0.012，R² = 0.9968，x為對(duì)照品濃度，μg/ml,y為吸光度△A。

總皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.012）÷ 0.0072×V樣÷(V樣÷V樣總×W)

                        =138.89×（△A+0.012）÷W

2. 以人參皂苷Re為對(duì)照品計(jì)算

標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài)下的回歸曲線為：y = 2.0466x - 0.0016，R² = 0.9983，x為對(duì)照品濃度，mg/ml,y為吸光度△A。

總皂苷含量(μg/g干重)=（△A+0.0016）÷ 2.0466×V樣÷(V樣÷V樣總×W)×1000

                        =488.62×（△A+0.0016）÷W

V樣：加入樣本體積，0.5ml；V樣總：加入提取液體積，1ml；W：樣本干重，g；1000，毫克到微克的換算系數(shù)。