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產(chǎn)品概述

AnnexinV-FITC/PI 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒（Annexin V-FITC/PI Apoptosis Detection Kit）是用FITC融合的重組人AnnexinV來(lái)檢測(cè)細(xì)胞凋亡時(shí)出現(xiàn)在細(xì)胞膜表面的磷酯酰絲氨酸（PS）的一種細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒。可以使用流式細(xì)胞儀、熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備進(jìn)行檢測(cè)。AnnexinV是一種分子量為35.8kD的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白，廣泛分布于真核細(xì)胞胞漿內(nèi)，參與細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。AnnexinV能與磷酯酰絲氨酸（phosphatidylserine，簡(jiǎn)稱PS） 高親和力、特異地結(jié)合。在正常細(xì)胞中，PS主要分布在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)，在細(xì)胞發(fā)生凋亡的早期，細(xì)胞膜上的PS會(huì)外翻到細(xì)胞表面。用帶有綠色熒光的AnnexinV-FITC標(biāo)識(shí)出凋亡細(xì)胞。

本試劑盒還提供了碘化丙啶（Propidium Iodide，PI），PI可以染色壞死細(xì)胞或凋亡晚期喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，呈現(xiàn)紅色熒光。用Annexin V-FITC和碘化丙啶染色后，正常的活細(xì)胞不被Annexin V-FITC和PI染色；凋亡早期的細(xì)胞僅被Annexin V-FITC染色，PI染色呈陰性；壞死細(xì)胞和凋亡晚期的細(xì)胞可以同時(shí)被Annexin V-FITC和PI雙重染色，以區(qū)別凋亡早期細(xì)胞。

注意事項(xiàng)：

1該試劑盒只能檢測(cè)活細(xì)胞，而不能用于切片、擦刮、固定或浸潤(rùn)細(xì)胞樣品的檢測(cè)。

2細(xì)胞凋亡是一種持續(xù)變化的動(dòng)態(tài)過(guò)程，選擇合適的誘導(dǎo)時(shí)間對(duì)觀察凋亡比較重要。染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加。

3如果有細(xì)菌或真菌污染，會(huì)嚴(yán)重影響檢測(cè)效果。

4PBS洗滌細(xì)胞，洗掉殘留的胰酶，否則殘留的胰酶會(huì)消化并降解AnnexinV-FITC，最終導(dǎo)致染色失敗。

5熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，同時(shí)在操作和存放過(guò)程中也盡量注意避光保存。

6為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

7檢測(cè)血液樣品時(shí)，如果含有血小板，請(qǐng)使用含有EDTA的緩沖劑并200×g離心洗去血小板。因?yàn)檠“搴?span>PS，能與AnnexinV結(jié)合，從而干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

8旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。

9AnnexinV-FITC和PI是光敏物質(zhì)，在操作時(shí)請(qǐng)注意避光。

保存條件：

4℃保存，Annexin V-FITC、PI 染色液需避光保存，半年有效。若長(zhǎng)期保存，可以把PI 染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存，Annexin V-FITC 結(jié)合液可以直接-20℃保存。