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Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml)

貨號 M9337 售價(jià)(元) 2450
規(guī)格 5×10mg CAS號 3513-03-9
  • 產(chǎn)品簡介
  • 相關(guān)產(chǎn)品

產(chǎn)品信息

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

價(jià)格

M9333

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

10mg

668

M9337

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

5×10mg

2450

M9339

Blasticidin S (10 mg/ml) 殺稻瘟菌素S (滅瘟素)(10 mg/ml

10×10mg

3873

產(chǎn)品簡介

Blasticidin S是一種來自Streptomyces griseochromogenes的核苷類抗生素,通過干擾核糖體中肽鍵的形成來特異性地抑制原核和真核生物的蛋白質(zhì)合成。Blasticidin S用于篩選攜帶有bsrBSD耐受基因的轉(zhuǎn)染細(xì)胞。殺稻瘟菌素具有快速而強(qiáng)效的作用模式,很低的抗生素濃度便能導(dǎo)致細(xì)胞迅速死亡。

  貨號M9333,M9337,M9339均已均已液體形式提供,濃度為10 mg/mlin HEPES緩沖液,pH 7.5)。

抗性基因

目前已經(jīng)克隆和測序的殺稻瘟菌素耐受基因有3種,一種是分離自產(chǎn)生菌Streptoverticillum sp.的乙?;D(zhuǎn)移酶基因bls,另外兩種是脫氨酶基因,包括從Bacillus cereus 中分離的bsr和從Aspergillus terreus 中分離的BSD 基因。Bsr BSD基因是最常用的篩選標(biāo)志,用于哺乳動(dòng)物和植物細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn),也可用于E.Coli。

產(chǎn)品性質(zhì)

分子式(Formula):C17H26N8O5·HCl

Cas:3513-03-9

分子量(Molecular Weight):458.9

外觀(Appearance):白色凍干粉末

純度(Purity):>95%HPLC

濃度:10 mg/ml in HEPES 緩沖液,pH 7.5

應(yīng)用參考濃度:

1)Escherichia coli

E. coli對Blasticidin S的敏感性稍差,但是轉(zhuǎn)化子對Blasticidin S具有耐受性,可以用低鹽LB培養(yǎng)基(pH 8)進(jìn)行篩選,濃度范圍為50-100 μg/ml Blasticidin S。高的pH值可以提高Blasticidin S的活性。

2)哺乳動(dòng)物細(xì)胞

哺乳動(dòng)物細(xì)胞中Blasticidin S的工作濃度范圍在1-50 μg/ml。初次實(shí)驗(yàn)建議通過滅殺曲線來確定佳使用濃度。

- 25-100 μg/ml in bacteria

- 1-30 μg/ml in mammalian cells

操作步驟(哺乳動(dòng)物穩(wěn)轉(zhuǎn)株篩選)

Blasticidin S通常使用濃度為10 μg/ml。攜帶bsrBSD基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,在含有Blasticidin S的正常生長培養(yǎng)基中孵育,用于篩選穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株。

(1)轉(zhuǎn)染后48h,用含有適宜濃度Blasticidin S的新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞傳代(注:細(xì)胞處于活躍分裂期時(shí)抗生素工作好。細(xì)胞密度太高,抗生素效率降低。細(xì)胞分盤時(shí)覆蓋率不超過25%);

(2)每3-4天去除培養(yǎng)基,加入含抗生素的新鮮培養(yǎng)基;

(3)7天后檢測細(xì)胞集落形成。根據(jù)宿主細(xì)胞種類和轉(zhuǎn)染/篩選效率,集落形成可能需要增加一周或更久。

(4)轉(zhuǎn)移5-10個(gè)耐受克隆到35mm細(xì)胞盤中,加入選擇培養(yǎng)基維持培養(yǎng)7天。隨后用細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測。

相關(guān)產(chǎn)品:

貨號

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

單價(jià)

M0943

潮霉素B Hyaromycin B 

1g

650

M0942

潮霉素B50 mg/mlHygromycin B (50 mg/ml)

1g

680

M0336

Phleomycin (20mg/ml) 腐草霉素(20 mg/ml

20mg

921

M1113

Zeocin博萊霉素(100 mg/ml

8×125mg

2200

M2150

Puromycin Dihydrochloride嘌呤霉素鹽酸鹽

25mg

678

CB937

Vancomycin Hydrochloride 鹽酸萬古霉素

1g

1868

運(yùn)輸和保存方法

冰袋運(yùn)輸。-20℃,避免反復(fù)凍融,有效期一年。



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